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　　微生物涵蓋了有益跟有害的眾多種類(lèi)，廣泛涉及食品、醫(yī)藥、工農(nóng)業(yè)、環(huán)保等諸多領(lǐng)域。有效地進(jìn)行微生物檢測(cè)，確定微生物的含量，才能采取有效的措施，從而保障人們的身體健康不受微生物的危害。

　　微生物檢測(cè)方法

　　1、電子計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)法

　　電子計(jì)數(shù)器的工作原理是測(cè)定小孔中液體的電阻變化，小孔僅能通過(guò)一個(gè)細(xì)胞，當(dāng)一個(gè)細(xì)胞通過(guò)這個(gè)小孔時(shí)，電阻明顯增加，形成一個(gè)脈沖，自動(dòng)記錄在電子記錄裝置上。

　　該法測(cè)定結(jié)果較準(zhǔn)確，但它只識(shí)別顆粒大小，而不能區(qū)分是否為細(xì)菌。因此，要求菌懸液中不含任何碎片。

　　2、計(jì)數(shù)器測(cè)定法

　　即用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。取一定體積的樣品細(xì)胞懸液置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)室內(nèi)，用顯微鏡觀察計(jì)數(shù)。

　　由于計(jì)數(shù)室的容積是一定的（0.1mm3)，因而根據(jù)計(jì)數(shù)器刻度內(nèi)的細(xì)菌數(shù)，可計(jì)算樣品中的含菌數(shù)。本法簡(jiǎn)便易行，可立即得出結(jié)果，不僅適于細(xì)菌計(jì)數(shù)，也適用于酵母菌及霉菌孢子計(jì)數(shù)。

　　3、比濁法

　　比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量。細(xì)菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比，與光密度成正比，所以，可用光電比色計(jì)測(cè)定菌液，用光密度（OD值）表示樣品菌液濃度。

　　此法簡(jiǎn)便快捷，但只能檢測(cè)含有大量細(xì)菌的懸浮液，得出相對(duì)的細(xì)菌數(shù)目，對(duì)顏色太深的樣品，不能用此法測(cè)定。

　　4、測(cè)定細(xì)胞總氮量或總碳量

　　氮、碳是細(xì)胞的主要成分，含量較穩(wěn)定，測(cè)定氮、碳的含量可以推知細(xì)胞的質(zhì)量。此法適于濃度較高的微生物檢測(cè)。

　　5、活細(xì)胞計(jì)數(shù)法

　　常用的有平板菌落計(jì)數(shù)法，是根據(jù)每個(gè)活的細(xì)菌能長(zhǎng)出一個(gè)菌落的原理設(shè)計(jì)的。取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋?zhuān)缓髮⒍康南♂屢哼M(jìn)行平板培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù)，可算出活菌數(shù)。

　　此法靈敏度高，是一種檢測(cè)污染活菌數(shù)的方法，也是目前國(guó)際上許多國(guó)家所采用的微生物檢測(cè)方法。使用該法應(yīng)注意：

　?、僖话氵x取菌落數(shù)在30～300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，過(guò)多或過(guò)少均不準(zhǔn)確；；

　?、跒榱朔乐咕渎?，影響計(jì)數(shù)，可在培養(yǎng)基中加入0.001%的2,3,5－氯化三苯基四氮唑（TTC);

　?、郾痉ㄏ抻糜谛纬删涞奈⑸铩V泛應(yīng)用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細(xì)菌檢驗(yàn)，是常用的微生物檢測(cè)方法。

　　6、測(cè)定細(xì)胞重量法

　　此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進(jìn)行稱(chēng)重；干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后，以清水洗凈放入干燥器加熱烘干，使之失去水分然后稱(chēng)重。此法適于菌體濃度較高的樣品，是微生物檢測(cè)的一種常用方法。

　　微生物檢測(cè)步驟

　　一、接種

　　將微生物接到適于它生長(zhǎng)繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過(guò)程叫做接種。

　　二、分離純化

　　含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱(chēng)為混和培養(yǎng)物(mixedculture)。如果在一個(gè)菌落中所有細(xì)胞均來(lái)自于一個(gè)親代細(xì)胞，那么這個(gè)菌落稱(chēng)為純培養(yǎng)(pureculture)。在進(jìn)行菌種鑒定時(shí)，所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。得到純培養(yǎng)的過(guò)程稱(chēng)為分離純化，方法有許多種。

　　三、培養(yǎng)

　　1、根據(jù)培養(yǎng)時(shí)是否需要氧氣，可分為好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)兩大類(lèi)。

　　2、根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)，可分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)兩大類(lèi)。

　　四、常規(guī)鑒定技術(shù)

　　(一)形態(tài)結(jié)構(gòu)和培養(yǎng)特性觀察

　　(二)生理生化試驗(yàn)

　　(三)化學(xué)成分分析

　　五、微生物保存

　　基本原理是在挑選優(yōu)良純培養(yǎng)物并使其處于休眠狀態(tài)基礎(chǔ)上，人為地創(chuàng)造一個(gè)有利于休眠的環(huán)境，使其長(zhǎng)期保存后仍能保持菌種原有的優(yōu)良特性?；敬胧┦堑蜏亍⒄婵?、干燥。